한국잔디는 화본과의 Zoysia속에 속해 있으며, 필리핀, 태국을 비롯한 동남아시아의 열대 지역부터 한국, 일본, 중국 등 동북아시아의 온대 기후 전역에 걸쳐 분포하고 있다(Engelke et al., 1983). 세계적으로 한국잔디류에는 10개 종이 있으며, 국내에는 들잔디(Zoysia japonica Steud.), 갯잔디(Z. sinica Hance.), 왕잔디(Z. machrostachya Franch. and Sav.), 금잔디(Z. matrella [L.] Merr.)가 자생하는 것으로 보고되고 있다(Choi, 1997; Choi et al., 1997).

Yu et al. (1974)은 우리나라에 자생하고 있는 잔디종류로서 들잔디, 비단잔디, 금잔디 3군으로 구별하였다. Choi et al. (1997)은 국내에 자생하는 한국잔디 종은 들잔디, 금잔디, 갯잔디, 왕잔디형이 관찰되었고, 이들 내에서 중간적인 형태특성을 보이는 교잡종과 변이종이 존재한다고 보고하고 있다. 한국잔디의 형태적 조사 결과 지역에 따라 그 형태에 있어서 많은 변이를 나타내었다(Bae et al., 2010).

한국잔디의 타가수분율은 약 11-49%로 자가수정 및 타가수정에 의하여 모두 종자가 발생하여 종내 뿐만 아니라 종간에도 교잡이 가능한 것으로 알려져 왔다(Choi et al., 2008; Engelke and Murray, 1989; Hong and Yeam, 1985). 이와 같은 Zoysia속에 속하는 종들은 근연종간에도 형태적으로 매우 비슷하며 식별이 어렵고, 종간교잡능력이 있기 때문에 상호교잡이 용이하여 종간 및 종내 변이가 심하게 나타나 한국잔디의 분류가 어려운 것으로 보고되어 있다(Hong and Yeam, 1985). 환경의 자생력과 적응력이 우수한 한국잔디의 여러 잡종형태의 생태형이 발생하면서 다양한 유전적 변이를 보이기 때문에 생식형태가 유사한 화본과 잔디의 경우 이들로부터 형질에 차이를 보였다(Kang et al., 2008; O’Brien, 2012).

최근 한국잔디의 이용범위가 더욱 다양해지고 사용면적도 확대됨에 따라 잔디 신품종 요구도가 증가되고 있다(Choi and Yang, 2006). 이에 따라 국내 한국잔디의 자생지 현황조사 및 수집을 통해 신품종 개발에 대한 연구들이 진행되고 있고(Bae et al., 2010), 근연종간에 교잡으로 중간형이 출현함에 따라 다양한 유전적 변이를 보이는 교잡종 및 변이종 특성과 육종연구를 수행하여 신품종을 발표하였다(Bae et al., 2013; Choi and Yang, 2004; Lee et al., 1997). 이와 같이 변이에 의한 형질에 차이를 보이는 계통의 선발이 품종개발의 주요 수단이 되고 있다(Chung et al., 2013).

현재 National Turfgrass Evaluation Program(NTEP) 에 등록된 한국잔디 품종은 11종이며, 이중 1종은 종자형으로 개발되어 이용되고 있는 상태이다(www.ntep.org, 2010). 한국잔디는 주로 영양번식을 실시하여 왔으나 종자형 품종의 등장으로 인해 그 이용도는 급속하게 늘어날 것으로 예상된다. 특히 ‘Zenith’와 같은 종자형 품종은 이미 국내에 도입되어 이용되고 있는 상황이다.

따라서 본 연구에서는 국내에서 자생하고 있는 한국잔디 유전자원 수집 및 유전자원을 이용하여 종자형 계통을 육성을 위해 한국잔디 종간의 종자 형태 및 변이 특성을 분석하여 육종에 직접 이용될 수 있는 유전적 변이 확대를 위한 자료로 이용하고자 연구를 수행하였다.

자생 한국잔디 수집은 2010년 5월부터 2012년 9월까지 남·동해안 및 서해안, 도서, 내륙지역에서 수행되었다. 지역별로 한국잔디가 다양하게 분포되어 있을 것이라고 예상되는 곳을 시·군 단위로 나누어 자생하는 한국잔디 총 241개체를 수집하였다. 수집 시기는 생육이 왕성한 5-9월을 중심으로 하였으며, 수집 시간은 오전 10시부터 오후 3시까지로 맑은 날 하였다. 한국잔디의 지역별 개체 수집은 5엽이 완전 전개된 것을 기준으로 초장, 엽폭과 잎털의 유무, 종자의 형태, 종자의 크기, 생육환경별로 다양한 변이를 보이는 것들을 수집하였다. 자생지 환경 분석은 수집 당시의 자원상태, 수집지 환경, 지형 등을 조사하였다.

한국잔디별 분류는 Choi 등(1997)의 형태적 특성을 기준으로 하여 엽폭 5.0 mm이상, 잎털이 많고, 종자길이 3.5 mm이하, 화서당 종자수 40개 이상의 특성을 보이는 것을 들잔디(Zoysia japonica Steud.)로 하였다. 해안지역에서 발견되어 엽폭이 3.0-4.0 mm이고, 잎에 털이 없고, 종자길이 6.0-8.0 mm정도인 것을 갯잔디(Z. sinica Hance.)로 하고, 갯잔디와 유사한 생육을 보이나 엽폭이 넓고, 종자가 더 큰 것을 왕잔디(Z. machrostachya Franch. and Sav.)으로 구분하였다. 초장이 짧고 엽폭 2.0 mm이하, 화서당 종자수 10-15개 특성을 보이는 것을 금잔디(Z. matrella [L.] Merr.)로 하였다. 엽폭이 3.0-4.0 mm수준이며, 종자길이 3.0-6.0 mm, 화서당 종자수 25-35개 정도인 것을 중지(interspecific hybrid zoysia)로 구분하였다(Choi et al., 1997; Patton and Reicher, 2007).

수집해 온 241개 한국잔디를 경남 진주 국립산림과학원 남부산림자원연구소 유전자원포장에 이식을 하였다. 1.3×1.3 m²크기의 plot에 마사토를 깔아 수집해 온 잔디를 줄떼로 심고, 뿌리의 활착을 위해 하루에 1번 관수를 하였다. 수집지에서 가져 온 상태를 그대로 유지하기 위해 잔디깎기와 비료시비를 하지 않았다. 이식 후 유전자원포장에서 개화되어 종자 임실이 완전한 상태의 15개의 꽃대를 뽑아 화서길이, 화서당 종자수, 종자길이, 종자폭, 종자길이와 폭의 비를 조사하였다. 종자길이와 종자폭은 광학 현미경(Leica Microsystems Gmbh Wetzlar, Germany)으로 측정을 하여 종자길이와 폭의 비를 구하였다.

자료분석은 한국잔디의 조사된 종자의 형태적 형질을 SAS 프로그램(SAS 9.2)을 이용한 분산분석, 산포도, 판별 분석과 SPSS 통계프로그램을 이용해 유클리디안 제곱거리로 군집분석을 수행하였다.

한국잔디는 각 지역별로 241개체 중 들잔디 79개체, 갯잔디 40개체, 왕잔디 5개체, 금잔디 18개체, 중지 99개체를 수집하였다. 수집된 자생 한국잔디의 종자 형태적 특성을 조사하여 형태 형질의 평균 특성을 살펴본 결과 화서길이의 경우 갯잔디가 4.3 cm로 가장 길었고, 금잔디는 1.3 cm로 가장 짧은 특성을 보여 유의적인 차이가 있었다(Table 1). 들잔디와 중지는 각각 3.0 cm와 3.1 cm로 그룹간의 유의적인 차이가 없었다.

종자길이는 갯잔디가 7.6 mm로 가장 길었고, 금잔디와 들잔디는 3.3과, 3.5 mm로 가장 짧은 특성을 나타내었다(Fig. 1). 중지는 4.4 mm로 들잔디, 금잔디와 유의적인 차이를 보였다. 종자폭은 금잔디가 1.1 mm로 가장 좁았으며, 들잔디와 왕잔디, 갯잔디, 중지 각각 1.4와 1.5 mm로 유의적인 차이가 없었다.

종자길이와 폭의 비는 갯잔디가 5.0으로 긴 형태를 나타내었고, 유의적인 차이는 없으나 금잔디와 중지는 각각 3.1과 3.0이고, 들잔디는 2.4로 종간의 차이를 확인 할 수 있었다.

화서당 종자수는 들잔디가 44.9개로 가장 많았으며, 다음은 중지 33.1개로 유의적인 차이가 있었다. 갯잔디와 왕잔디는 각각 21.3개와 21.2로 유의적인 차이는 없었으나, 금잔디의 경우 14.9개로 가장 적은 수의 특성을 보여 유의적인 차이가 나타났다.

Hong and Yeam (1985)은 한국잔디의 종간 교배 육종에 사용된 모본의 특성으로 들잔디, 금잔디, 갯잔디, 왕잔디의 종자길이는 각각 2.4, 2.7, 5.3, 5.4 mm로 보고하였다. Choi et al. (1997)은 종자형태 등을 이용하여 한국잔디류의 형태적 특성을 조사한 결과 들잔디 유형은 화서당 종자수가 45개로 가장 많은 특성을 나타내었다. 갯잔디 유형은 종자길이가 6.5 mm로 긴 형태를 나타내었고, 중간적인 특성을 보이는 교잡종은 종자길이 3.8 mm, 화서당 종자수는 31개로 나타났다고 하였는데 본 조사결과도 이들의 보고와 유사한 특성을 보였다.

종자형태 연구는 많은 학자들에 의해 수행되어 왔으며, 속(genus)이나 절(section)의 분류학적 한계를 결정하는데 유용한 것으로 알려져 있다(Gil-ad, 1997). 이와 같이 종자형태 형질을 이용하여 형질조합에 의한 산포도를 알아본 결과 화서길이 조합의 경우 화서길이와 화서당 종자수, 화서길이와 종자길이, 화서길이와 종자폭, 화서길이와 종자길이와 폭의 비의 두 형질을 동시에 고려한 산포도를 보면 들잔디, 중지, 갯잔디와 왕잔디, 금잔디로 나뉘어졌으며, 갯잔디와 금잔디는 비교적 명확히 구분이 되었다(Fig. 2). 화서당 종자수, 종자길이, 종자폭 조합에서도 유사한 경향을 나타내었다. 종자길이와 폭의 비 조합에서는 들잔디가 일정한 범위 안에 분포하고 짧은 특성을 보인 반면 중지와 차이가 있었다. 금잔디와 중지가 중복되는 경향을 보였으나 비교적 일정한 범위로 모이는 것으로 나타났다.

한국잔디 자생지 생태적 특성을 파악하기 위해 수집지의 환경을 조사한 결과 갯잔디와 왕잔디는 대부분 해안가에서 야생상태로 자생하는 것으로 확인 되었다(Fig. 3a). 들잔디는 주로 야생형태로 22.9%는 해안가에서 자생하고 있었고, 21.7%는 산림, 19.7%는 저수지 주변의 제방에서 분포하고 있었고, 15.7%는 경작지 주변, 13.3%는 길가에서 관찰되어 다양한 환경에서 생육하고 있었다. 중지도 야생상태로 34.6%가 해안가로 비교적 많은 개체들이 분포하고 있었고, 15.9%는 산림, 14.4%는 길가, 11.2%는 경작지에서 발견되어 중지 또한 들잔디와 같이 다양한 환경에서 생육함을 알 수 있었다. 한국잔디류는 국내 자생지에서 다양한 종류의 교잡종이 분포되고 있는 것으로 나타났으며, Choi et al. (1997)의 결과와도 유사한 것으로 판단된다. 반면에 금잔디는 48.8% 대부분 농가 정원 근처, 26.8%는 길가에서 식재 된 것이 확인 되었으며, 자연 상태에서 생육되는 것은 확인되지 않았다.

한국잔디의 수집 지형을 조사한 결과 들잔디는 전체 수집 개체 중에서 36.1%가 평지나 들판에서 확인되었으며, 22.9%는 해변, 21.7%는 산, 19.3%는 언덕에서 수집되어 다양한 지형에서 생육을 하고 있었다(Fig. 3b). 갯잔디와 왕잔디는 100.0%가 해변에서 분포를 하였다. 금잔디는 97.6% 대부분 평지에서 확인되었고, 중지는 32.7%가 평지, 다음으로는 28.0%가 해변, 23.4%는 언덕, 15.9%는 산으로 들잔디와 같이 다양한 지형에서 분포하고 있었다.

이상의 결과에서 들잔디와 중지의 경우 광범위하게 분포하여 다양한 환경과 생육특성을 보였으며, 갯잔디와 왕잔디는 특정 자생지 환경으로 독특한 생존전략으로 생육하고 있는 것으로 보아 종간의 생태적 특성이 상이함을 알 수 있었다. 이러한 서로 다른 생태적 특성으로 인해 비교적 종간의 구별이 가능하였다.

형태적 형질은 유전자의 발현에 기본을 두고 있으며, 자생지의 위도, 경도, 기상, 토양 등의 환경조건에 의하여 수형, 잎, 꽃, 종자 등 형태적 특성의 지리적 변이가 존재하고 있다는 것은 많은 연구들에서 보고되고 있는데(Kim, 1986; Lee and Kim, 1982), 이러한 집단의 유전적 다양성을 분석하는데 외부형태의 변이분석과 DNA 등과 같은 분자표지에 의해서 유전구조 양상을 구명하는 방법이 보편화되어 있다(Kim et al., 2005). 이와 같은 외부 형태적 특성을 통해 유전변이를 구명하기 위해서는 가능한 다양한 집단을 대상으로 각 집단의 변이를 명확히 대표할 수 있는 형질을 선정하여야 하고, 집단간, 집단내 개체간의 변이의 폭과 내용을 알고 집단간의 유연관계를 밝혀 주는 것이 중요하다(Song et al., 2000).

이와 같이 한국잔디 분류에 유용한 종자 형태 및 생태적 특성을 통해 한국잔디의 종간의 차이를 확인 할 수 있었고, 전체 수집종 241개체 중에서 중간특성을 보이는 교잡종 및 변이종으로 추정되는 중지가 99개체로 41% 수집되어 미확인된 종으로 이에 대한 연구가 수행되어야 할 것으로 판단되었다.

따라서 수집된 중지의 종간 교잡 및 변이 정도를 추정하고자 종자 형질을 이용하여 군집분석을 한 결과 갯잔디형과 들잔디형으로 나뉘어졌으며, 각 형태별로 2개의 군으로 분류되었다(Fig. 4). 이는 Choi et al. (1997)의 들잔디형과 갯잔디형 특성을 보이는 교잡종 및 변이종을 확인한 결과와 유사하였고, 갯잔디와 들잔디 이들 간의 교잡종들이 많이 형성되어 있다고 하였다(Hong and Yeam, 1985).

갯잔디형 I군의 경우 자생지 환경은 해안가 및 들잔디가 자생하는 해안지역 산림과 길가에서 분포하여 대부분 해안가에 분포하는 II군에 비해 갯잔디와 들잔디의 교잡이 된 형태특성을 나타내었다(Table 2). 화서당 종자수는 I군 30.1개, II군 17.5개로 I군이 많았고, 종자길이는 I군 4.6 mm로 II군 5.2 mm보다 짧은 특성을 나타내었다. 현재 국내에서 사용중인 한국잔디는 들잔디와 갯잔디의 교잡종이 대부분으로(Choi and Yang, 2005) I군은 화서당 종자수 31개, 종자길이 3.8 mm인 들잔디와 갯잔디의 중간적인 특성을 보이는 교잡종과 유사한 형태를 보였으며(Choi et al, 1997), II군은 전형적인 갯잔디와 유사하였다.

들잔디형 III군과 IV군의 자생지 환경은 해안이 아닌 내륙의 산림, 길가, 경작지에 분포하였다. III군과 IV군 각각 화서당 종자수는 59.2개와 45.8개, 종자길이는 3.3과 3.4mm, 종자길이와 폭의 비는 2.5로 들잔디와 유사한 특성을 나타내었다.

이상의 결과로 중지는 해안가, 산림, 길가, 경작지 등 광범위하게 자생하고 있는 한국잔디와 종간교잡으로 자생지 환경에 따라 종자 형태에 있어 변이를 나타내는 중간종이 많이 분포하고 있었다. 이는 교잡 친화력이 있는 한국잔디가(Forbes, 1952; Hong and Yeam, 1985) 서로 자연교잡되어 연속적인 변이를 보이는 결과라고 추정되어지고(Choi et al., 1997), Christians과 Engelke (1994)가 Z. koreana는 들잔디와 왕잔디의 교잡종이라고 추정한 것과 같이 자연 상태에서 교잡된 변이들이 존재한다는 보고와 유사하였다. 이와 같이 국내에 많이 분포하고 있는 교잡종 및 변종들은 생육속도가 빠르고 강한 내환경성 등 다양한 특성을 가지고 있어 다수확 종자형 품종 등 목적에 부합되는 품종개발을 위한 육종재료로 활용가치가 높다(Choi and Yang, 2005; Lee et al., 1997).

이와 같은 육종재료를 활용하여 효율적인 육종을 위해 주요 형질의 유전 양상의 이해와 유전자원의 수집 분류 및 평가가 중요하다. 이를 위해 자생 한국잔디 종별로 조사된 종자 형질 특성을 이용하여 종간 유사성을 거리지수로 구분한 결과 들잔디와 중지, 갯잔디와 왕잔디, 금잔디와 중지가 유사한 집단으로 확인되었으며, 한국잔디의 판별 확률은 갯잔디 84.9%, 금잔디 66.7%, 들잔디 88.9%, 중지 63.4%로 나타났다(Table 3). 한국잔디의 기본종과 교잡종을 분류하기 위하여 판별함수를 이용한 유효인자의 계수와 식의 상수를 도출한 결과 화서길이, 종자길이, 종자폭, 종자길이와 종자폭의 비율, 화서당 종자수가 유효한 인자로 확인되었다(Table 4). 이러한 결과는 자연상태에서 한국잔디의 종간교배 및 생육지의 입지적 특성 등 자생지 환경인자와 상관이 깊은 것으로 나타났으며, 판별함수를 이용하여 한국잔디 종간의 구별 가능성은 보였지만, 설명력을 높이기 위한 지속적으로 변수 선택법 개발이 필요하였다. 또한 한국잔디의 종간 해석은 비교적 질적인 유전정보를 많이 함축하고 있는 종자의 형질을 이용하여 분류를 하면 추정이 가능하지만 좀더 정확한 판단을 위해서는 분자학적 분석이 필요할 것으로 판단되었다.